復合酶法提取茯苓多糖反應條件溫和,通過 裂解茯苓細胞壁結構而促進茯苓多糖的溶出,提 高了其多糖提取率。 利用高速振動和空化效應, 超聲提取法既提高了多糖提取率,又縮短了提取 時間。 綜上,筆者結合復合酶法和超聲提取法的 優(yōu)勢,開展超聲輔助酶法提取茯苓多糖的研究。 但由于該提取法在提取中易受復合酶種類、比例、 活性和提取條件等因素的影響,導致茯苓多糖提 取率穩(wěn)定性和重復性較差。FA1204 電子天平(上海皓莊儀器有限公司); KQ-100DB 超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限 公司);Specord 50 plus 紫外可見分光光度計(德國 耶拿分析儀器股份公司);SHZ-DⅢ循環(huán)水真空泵 (鞏義市予華儀器有限責任公司); SX-610 筆式 pH 計(上海三信儀表廠)。
綜合纖維素酶和木瓜蛋白酶的最適溫度,選擇超 聲輔助酶法提取溫度為 55℃ 。 根據(jù)單因素試驗結 果,發(fā)現(xiàn) pH、料液比和復合酶添加量三個因素對 茯苓多糖提取率的影響最大。 單因素結果表明: pH 為 5,料液比為 1 ∶ 50,復合酶添加量為 8%時 茯苓多糖提取率最高,以此為中心點,以茯苓多糖 提取率為響應值,采用 Design Expert 8. 0. 6 軟件設 計 3 因素 3 水平響應面分析共 17 次試驗,中心點 重復 5 次試驗 。在此條件下,其提取率為 7. 47 ± 0. 07%。 其原因為纖維素酶可降解細胞壁中的纖 維素和非特異性裂解細胞壁中的幾丁質;木瓜蛋 白酶也可非特異性裂解細胞壁中的幾丁質,并通 過降解蛋白質而將多糖和蛋白質分離。